原代肌腱细胞转染siRNA

2023-04-21

siRNA转染步骤:

1、合成siRNA时请带荧光,若siRNA不带荧光、请使用荧光对照,方便查看转染效率

2、siRNA浓度:20uM/L

3、siRNA和转染试剂复合物制备:siRNA 8ul和转染试剂8ul,吹打混匀室温静置15分钟,无需另外加入任何试剂稀释

4、细胞转染前状态:拍明场细胞照片留存

5、贴壁细胞铺板:6孔板完全培养基2ml、培养基中不加双抗,细胞密度:60%左右(不同细胞,按48小时生长到90%,往前推算细胞铺板密度)

6、转染:将复合物加入轻摇混匀、培养箱培养

7、换液:转染24小时后培养基换液

8、转染效率:转染48小时后拍荧光照片,查看转染效率

9、转染后细胞状态:拍明场细胞状态照片

10、检测:总计转染48小时后提取RNA或蛋白检测


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