qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

从人类血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

回收游离DNA。

在24个血浆样本中加入同等量的DNA片段（200 bp和1000 bp）。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从5 ml血浆中纯化DNA，洗脱体积为80 μl。使用QuantiTect Multiplex PCR Kit对每个DNA片段特异性的66 bp靶点进行双重real-time PCR，定量DNA的产量。

回收片段化DNA，表现更出色。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从5 ml血浆中纯化游离DNA，或者使用QIAamp MinElute Virus Vacuum Kit从200 μl血浆中纯化游离DNA，洗脱体积为100 μl。使用QuantTect Multiplex PCR Kit对18S rRNA基因内的66 bp扩增片段和500 bp扩增片段进行双重real-time PCR，定量DNA的产量。500 bp扩增片段和66 bp扩增片段的扩增差异显示DNA被片段化，从而导致完整的500 bp目标序列的丰度低于较短的66 bp靶点。（请注意差异大于五倍样本输入体积差异）。

高效纯化游离miRNA。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从4 ml采集血浆中纯化游离DNA，洗脱体积为50 μl。将标准试剂盒实验方案与适用于miRNA的实验方案进行比较。使用TaqMan microRNA Assay（Applied Biosystems）定量miRNA 30b的产量，使用Human miScript Assay（QIAGEN）定量miRNA 16的产量。采用miRNA实验方案获得的C_T值较低，表示miRNA的产量更高。

高效回收甲基化DNA。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从4 ml血浆中纯化加入的甲基化DNA和非目标poly-A RNA，洗脱体积为45 μl。使用EpiTect Bisulfite Kit（QIAGEN）进行亚硫酸氢盐转化，使用real-time MSP分析和QuantiTect Multiplex PCR Kit组分在ABI PRISM 7900HT Sequence Detection System上进行甲基化特异性PCR（MSP）。对两个全甲基化位点数据进行分析。

qiagen

erformance

分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸通常都是<1000bp（DNA）或<1000nt（RNA）的片段。此外，小至21nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从人类血浆、血清和其他无细胞体液中高效纯化游离核酸。纯化效率高、重现性好、产量高（参见"Reproducible recovery of circulating DNA"）。应用延长的上样管和真空装置QIAvac 24 Plus可将样品处理量提至5ml，洗脱体积可在20–150μl之间灵活变化，可浓缩低浓度核酸。该试剂盒采用先进的技术，硅胶膜选择性的结合目标核酸，提高片段化核酸的回收率（参见"Improved recovery of fragmented DNA"）。

使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化，纯化获得不含DNA的游离RNA。特别设计的流程确保高效纯化诸如miRNA等小RNA（参见"Efficient purification of circulating miRNA"）。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit高效纯化甲基化DNA，经纯化的DNA维持其甲基化状态，可进行亚硫酸氢盐转化实验，进行甲基化状态分析（参见"Efficient recovery of methylated DNA"）。

经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可即用于各种下游应用，包括：

PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR

用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测

病毒核酸检测