SMM 293-TI含有细胞生长所需的全部营养成份，无需添加任何添加物即可使用。其化学成分明确，主要包含细胞生长所需的无机盐， HEPES， 碳酸氢钠， 必需和非必需氨基酸， 维生素， 酚红， 微量元素， PluronicÒ F-68和其他无机物（注意：此培养基不包含抗生素以及血清）。

迅速取出冻存的细胞，在37 ℃水浴条件下进行解冻（可以在水中轻轻晃动，时间控制在30s以内）；轻轻地混匀细胞并将融化的细胞全部移至50 mL无菌离心管中，逐滴加入10 mL预热到37℃的培养基，离心换液（100 g，3 min）去除全部上清，加入293新鲜培养基重悬，使得细胞密度达到0.4~0.6×10⁶cells/mL；将细胞置于37℃，5%CO₂，转速为110~175rpm的恒温摇床中进行培养；2-5天后通过人工或仪器测定细胞的密度以及活率，如果细胞密度达到1.0×10⁶cells/mL，活率85%以上则可进行传代培养；如果细胞密度低于1.0×10⁶cells/mL，则建议对细胞进行离心（100g，5min），然后重悬于20-30mL 的新鲜培养基中使得细胞密度为0.6×10⁶cells/mL 左右，并继续培养至细胞正常生长则可进行传代培养。

将培养在加有5~10%血清的传统培养基或其他无血清培养基里的细胞，直接稀释传代到SMM 293-TI培养基中，细胞密度控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL；将细胞置于37 ℃，5% CO₂，转速为110~175 rpm的恒温摇床中进行培养；4~6天后对细胞培养液进行稀释（或者离心更换上清），保持稀释（或者离心）后细胞密度为0.3~0.4×10⁶cells/mL；经过在100%的 SMM 293-TI培养基中的几次传代培养，传代后4~6天细胞的密度可以达到2~3×10⁶cells/mL，细胞活率大于90%。这说明细胞已经*适应了SMM 293-TI培养基，之后进行细胞的传代培养时，细胞的起始密度可以降到0.2~0.3×10⁶/ml左右。

将培养在加有5~10%血清的传统培养基或其他无血清培养基里的细胞，直接稀释传代到SMM 293-TI培养基中，细胞密度控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL，原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为75:25；将细胞置于37℃，5%CO₂，转速为110-175rpm的恒温摇床中进行培养；4~6天后进行传代，如果细胞生长状态良好，且活率>90% 则传代时原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为50:50，细胞密度仍控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL。如细胞生长慢，可离心上清，留20%原培养基，加入80% 的新鲜SMM 293-TI培养基继续培养；重复步骤3逐步增加SMM 293-TI培养基所占的比例（原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为25:75至10:90）直到100%的SMM 293-TI培养基；经过在100%的SMM 293-TI培养基中的几次传代培养，传代后4~6天细胞的密度可以达到2~3×10⁶cells/mL，细胞活率大于90%。这说明细胞已经*适应了SMM 293-TI培养基，之后进行细胞的传代培养时，细胞的起始密度可以降到0.2~0.3×10⁶cells/mL。