QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K
QIAGEN蛋白酶K
用于DNA和RNA制备过程中的蛋白酶消化
QIAGEN蛋白酶和QIAGEN蛋白酶K在广泛的反应条件下具有高活性的广泛底物特异性。两种蛋白酶均在大多数DNA和RNA分离程序中常用的缓冲液中提供高活性,并且由QIAGEN保证质量。
QIAGEN蛋白酶是一种从重组芽孢杆菌菌株中分离的silu suan蛋白酶,是蛋白酶K的经济替代品,可从多种来源分离天然DNA和RNA。QIAGEN蛋白酶*不含DNase和RNase活性。
QIAGEN蛋白酶K是一种枯草杆菌蛋白酶型蛋白酶,从腐生真菌Tritirachium album中分离出来,特别适用于短消化时间。它具有很高的比活性,可以在很宽的温度和pH值范围内保持稳定,而在较高温度下的活性大大提高。可溶性钙对于酶活性不是必需的。这意味着用于抑制Mg 2 +依赖性酶(如核酸酶)的EDTA 不会抑制蛋白酶K的活性。
QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K
性能
QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K在大部分DNA和RNA纯化流程使用的缓冲液以及宽范围的盐、变性剂、洗涤剂、pH和温度条件下都有高活性(见表“常用缓冲液中的蛋白酶活性")。
常用缓冲液中的蛋白酶活性*缓冲液 | 活性(%) |
QIAGEN Protease | QIAGEN Proteinase K |
---|
30 mM Tris·Cl | 100 | 100 |
30 mM Tris·Cl; 30 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100; 800 mM GuHCl† | 210 | 313 |
36 mM Tris·Cl; 36 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.36% Triton X-100; 735 mM GuHCl‡ | 205 | 301 |
10 mM Tris·Cl; 25 mM EDTA; 100 mM NaCl; 0.5% SDS | 78 | 128 |
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 20 mM NaCl; 1% Sarkosyl | 101 | 74 |
10 mM Tris·Cl; 50 mM KCl; 1.5 mM MgCl2; 0.45% Tween 20; 0.5% Triton X-100 | 159 | 106 |
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 0.5% SDS | 98 | 120 |
30 mM Tris·Cl; 10 mM EDTA; 1% SDS | 38 | 203 |
* pH 8.0, 50°C, 1.25 µg/ml蛋白酶,孵育15 min。† QIAGEN Genomic-tip操作流程中使用的Buffer G2,用于从血液、细胞培养基和组织中纯化DNA。‡ 用于细菌DNA纯化的QIAGEN Genomic-tip实验方案中推荐的蛋白酶消化缓冲液条件(Buffers B1+ B2)。
原理
技术规格 | QIAGEN Protease | QIAGEN Proteinase K |
---|
规格 | 冻干粉 | 即用型溶液 |
量 | 7.5 AU或4 x 7.5 AU | 2 ml或10 ml (20 mg/ml) |
活性 | 45 mAU/mg蛋白 | >600 mAU/ml |
单位定义 | 一个mAU是指每分钟1 molluo an suan释放的斐林阳性的氨基酸和肽的活性 |
QIAGEN Proteinase K是从腐生菌Tritirachium album中提取的一种枯草杆菌蛋白酶,非常适合短时间消化。其特异性活性高,在很大的温度和pH 值范围内可保持稳定,并在高温时具有更高活性。可溶性钙在酶反应中不是必须的。所以用于抑制核酸酶等Mg2+依赖性酶的EDTA将不会抑制Proteinase K的活性。以下QIAGEN试剂盒中包含有Proteinase K:
QIAGEN Protease是从重组Bacillus菌株中提取的一种蛋白酶,可替代Proteinase K从多种样本中提取DNA和RNA,且价格较低。QIAGEN Protease没有DNase 和RNase活性。以下QIAGEN试剂盒中包含有QIAGEN Protease:
注意:使用手动QIAamp DNA Blood Kit和QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kit的用户应该用7 ml蒸馏水重悬每个瓶中的QIAGEN Protease。
注意:使用QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 Kit的用户应该用10 ml蒸馏水重悬每个瓶中的QIAGEN Protease。
注意:QIAGEN蛋白酶不可与DNeasy Tissue、DNeasy 96 Tissue及QIAamp DNA Mini Kit中的ATL缓冲液同时使用。在SDS浓度大于0.5%、肌氨酰浓度大于1%、或有高浓度的其他去污剂时,EDTA的浓度必须小于8 mM,这样才能在延长的孵育时间内达到an quan活性。
操作流程
QIAGEN Protease或QIAGEN Proteinase K的使用指南在相应的试剂盒手册中提供。
应用
QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K用于DNA和RNA制备过程中蛋白酶的消化。在设计蛋白酶消化时,应考虑两种酶之间的细微差异。
©
金山科研平台 Bio-Rad伯乐官网 |伯乐授权代理 |伯乐ddPCR| 伯乐Aminex| 伯乐层析填料色谱柱是专业的授权总代理区域代理经销平台。
© 如需询价,请加客服QQ:1749072012 、客服微信:jinshanbio,或发送邮件到1749072012@qq.com
© 平台为生命科学研究相关领域提供一站式耗材试剂仪器解决方案和采购服务,数据资源基于CC协议。
© 本文地址:
https://brandmillipore.cn/thread-46643.htm
特别声明:以上内容(如有图片亦包括在内)来源于授权厂家或网络,如有侵权,请联系客服删除,本平台不提供信息校正和存储服务。
Notice: The content above (including the pictures if any)comes from authorized manufacturers or networks. In case of infringement, please contact to delete it. This platform does not provide information storage services.