qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit（1000*50ul）

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR，用于基因表达分析

整合热启动，PCR特异性高可靠定量检测低丰度转录本准确定量检测各种起始量样本提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）两种包装无需优化反应和循环条件

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit（1000*50ul）

Real-Time PCR酶与试剂盒qPCR16一步法RT-PCR20两步法RT-PCR29QuantiTect SYBR^®Green PCR Kits

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使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR，用于基因表达分析

整合热启动，PCR特异性高可靠定量检测低丰度转录本准确定量检测各种起始量样本提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）两种包装无需优化反应和循环条件

QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和*的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP，可选择性进行UNG处理。为便于使用，预混液可储存在2–8°C。

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特异性定量检测。

在Rotor-Gene 3000上使用针对人BAX的QuantiTect Primer Assay和的试剂盒分析稀释的人白细胞cDNA。熔解曲线分析中出现单峰，NTC反应呈平直曲线，说明使用QuantiTect Kit和Assay可实现高特异性定量。NTC：无模板对照。Norm. Fluoro.：标准化的荧光。

Performance

QuantiTect SYBR Green PCR Kit在宽泛的范围内符合线性规律，可实现特异性定量检测（参见"Specific quantification over a wide linear range"）。与其他聚合酶相比，HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，进一步提高了PCR反应的特异性。*的PCR缓冲液和HotStarTaq DNA Polymerase，确保低丰度转录本的定量检测，低至5个拷贝的目标序列也可被准确检测（参见"Highly specific amplification"）。QuantiTect SYBR Green PCR Kit与QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用，可获得灵敏、可靠的结果（参见"Specific and sensitive quantification"）。

QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中经特别优化的UNG溶液配合经验证的PCR预混液可有效避免PCR产物中的残留污染，并对靶序列进行可靠的定量检测（参见"High specificity in real-time PCR"）。

Principle

QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有优化的即用型预混液，可使用SYBR Green I对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析，无需合成靶标特异性标记引物。*的PCR缓冲液含有K⁺和NH₄⁺，能促使特异性引物退火，获得高PCR特异性和灵敏度（参见"Specific primer annealing"）。此外，HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect SYBR Green PCR预混液含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 （UNG）预处理，保证之前反应残留的PCR产物会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的组份

组份	特点	优势
HotStarTaq DNA Polymerase	95ºC孵育15分钟即可活化	室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green PCR Buffer	NH4+和K+的平衡组合	特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix	含有dUTP，会部分替代dTTP，可进行UNG处理	可选择进行UNG处理，以消除之前反应残留的PCR产物
SYBR Green I dye	DNA双链结合时，生成强烈的荧光信号	高度灵敏的定量检测
ROX dye	在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准	可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪

Procedure

QuantiTect SYBR Green PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中，即可开始反应（参见"Two-step RT-PCR"）。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要，反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）预处理，以去除之前反应残留的PCR产物。

为在两步法real-time RT-PCR中获得理想结果，我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA，并可去除基因组DNA污染。

QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe上方便地订购。