X-α-galα-半乳糖苷酶显色底物-重组克隆表达-分子生物学

2023-10-29

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有效期3年
溶解性5mg/mL in DMF
别名5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-半乳糖苷
英文名称X-a-gal
CAS107021-38-5
分子式C14H15BrClNO6
分子量408.63
储存条件-20℃
纯度95%
外观(性状)白色或灰白色结晶粉末,或者无色结晶
单位

产品信息: X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。 X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。 x-α-gal a-半乳糖苷酶显色底物用途: (1)α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays; (2)用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌; (3)在组织化学中用于酶活性的检测; x-α-gal a-半乳糖苷酶显色底物 储存液的配制及使用步骤: A)涂布于预制平板:溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4mg/ mL的溶液。 ①涂布200ul(15cm) 或者100ul(10cm)X-α-gal 储存液于预制平板上; ②放于37℃培养箱至液体被吸收(由于DMF挥发性低,最长可放4小时); ③将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。 B)直接加入琼脂中:溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF,终浓度为20mg/ mL的溶液。 ①将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55 ℃; ②往已冷却的培养基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal储存液,混匀,快速倒平板。 外观:白色或灰白色结晶粉末,或者无色结晶; 溶解度(1%甲醇溶液):无色,清澈; 储存:-15°C避光避潮保存;

x-α-gal α-半乳糖苷酶显色底物

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