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SolarRed是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂。它可以替代高毒性染色剂－溴化乙锭（EB），用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA和ssDNA的染色。SolarRed的灵敏度远高于EB，并且不需要脱色。由于SolarRed和EB有相同的光谱特性，因此用它替代EB时不需要更换成像系统。

SolarRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高，并能排除染料对DNA迁移的干扰。使用SolarRed进行电泳后染色，操作简单不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在0.1M NaCl中，并将凝胶置于染色液中，30分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定，可以多次反复使用。相比而言，预制凝胶由于不需要额外染色过程，因此染料用量更少，更为简单经济。

除了无与伦比的灵敏度和稳定性外，独立实验室的毒性测试也显示，在凝胶染色的浓度下，SolarRed没有诱变性和细胞毒性。SolarRed安全性的关键在于它对于细胞膜完全没有通透性。

染料特点：

1、无毒性：SolarRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。

2、灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

3、稳定性高： 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。

4、信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。

5、操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

6、适用范围广：可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

与EB有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可。但是SolarRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发，因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置，我们推荐您使用solarGreen (Cat# G5570)，它和SYBR Green I 的光谱相似，灵敏度相当，但更加稳定。

SolarRed 使用方法简介

1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)

(1) 制胶时加入SolarRed核酸染料(例如：每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL SolarRed 10,000× 储液，以此比例类推)。

(2) 按照常规方法进行电泳。

注意事项：

(1) 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。

(2) 由于SolarRed具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将SolarRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。SolarRed兼容几乎所有常用的电泳缓冲溶液。

(3) 如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。

(4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

2.泡染法

(1) 按照常规方法进行电泳。

(2) 用H2O将SolarRed 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。(例如将15μL SolarRed 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右，染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10%丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。

注意事项：

(1) 用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

(2) 3×SolarRed染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

特别提醒：

(1) 如果您使用的是紫外成像仪，请选择SolarRed ;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，请选择SolarGreen。

(2) 在极少数情况下，质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低，此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。

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