2周标准鼠单抗佐剂-蛋白与免疫

2023-10-29

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2周标准鼠单抗佐剂

别名2周快速鼠多抗制备佐剂
英文名称SoFastAntibody-Mouse2W
储存条件2-8ºC 切勿冻存!
单位

用途:

通过 2 周 2 针的快速免疫程序快速制备小鼠多克隆抗体,ELISA 滴度(Cutoff 值为0.1000)可达到 1:1000-1:10000 或更高。

备注:

常温运输,2-8ºC 保存,无菌取用,有效期 12 个月。(切勿冻存!)

使用方法:

1. 用生理盐水将抗原稀释到 2 倍最终浓度(按每针次 50μl 用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次 5-20μg;(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次 1-5μg;(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次 20-50μg。

2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次 50μl )与抗原按体积比 1:1 迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。

3. 通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠,每只小鼠左、右腿各注射 1 针,每针次 100μl。 。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。 4. 第 14 天采微量尾血进行 ELISA 测定,抗体滴度应达到 1:1000-1:10000 或更高,随后即可采全血。

与常规使用的弗氏佐剂相比,SoFastAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面优点,详述如下: 1.SoFastAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。 2.SoFastAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,兔子20-50μg);(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。 3.SoFastAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。 4.SoFastAntibody不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。 5.SoFastAntibody是一类水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可用于免疫动物。 6.SoFastAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备过程中使用足垫免疫或脾内免疫相比,极大地方便了使用。 7.SoFastAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托专门单位制备。使用SoFastAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克隆抗体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。 8.SoFastAntibody建议常温运输,2~8ºC保存,无菌取用,有效期12个月。

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