BCA蛋白浓度测定试剂盒500微孔(50T)-蛋白提取/定量-蛋白与免疫

2023-10-29

平台授权一级代理,咨询微信:jinshanbio

BCA蛋白浓度测定试剂盒500微孔(50T)

英文名称BCA Protein Assay Kit
储存条件按要求储存,有效期1年
单位

产品简介:

碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明:

一. 微孔酶标仪法

1.配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL。

3.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二. 分光光度计法 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下:

1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.稀释标准品:取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。

3.取八支(或者更多)5mL离心管,标上号,按下表加入试剂。

4.37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项:

1.长期不用时,Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。

2.样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

授权一级代理请认准金山科研平台,产品价格和货期请咨询微信:jinshanbio ,询价请加微信:jinshanbio

© 金山科研平台 Bio-Rad伯乐官网 |伯乐授权代理 |伯乐ddPCR| 伯乐Aminex| 伯乐层析填料色谱柱是专业的授权总代理区域代理经销平台。
© 如需询价,请加客服QQ:1749072012 、客服微信:jinshanbio,或发送邮件到1749072012@qq.com
© 平台为生命科学研究相关领域提供一站式耗材试剂仪器解决方案和采购服务,数据资源基于CC协议。
© 本文地址:https://brandmillipore.cn/thread-60607.htm
产品询价需求提交
返回
扫码添加客服微信,咨询产品报价