4×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)-蛋白电泳/marker-蛋白与免疫

2023-10-29

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4×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)

英文名称SDS-PAGE loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)
储存条件-20℃,有效期1年
外观(性状)蓝色粘稠液体
单位

保存: -20℃,有效期一年。 产品简介: 本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,β-巯基乙醇,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。 SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构;β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关;溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。 使用说明: 1. 请按每30μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释样品。 2. 混匀后,100℃水浴加热3-5分钟,使蛋白变性。 3. 冷却到室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。 注意事项: 1. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右;胶浓度12%时,约在20kd左右;胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。 2. 本试剂因含β-巯基乙醇,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

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