TOROGreen®qPCR Master Mix(QST-100P)
高稳定高GC染料法定量PCR Mix
目录价: ¥750.00
规格:1mL×5 tubes/bag
高稳定高GC染料法定量PCR Mix
TOROGreen®qPCR Master Mix(QST-100P)
高特异性:高封闭Taq抗体和优化的PCR缓冲液双重作用大大降低了引物二聚体的产生。
室温稳定:在储存和运输过程中,性能不容易随温度变化而降低;完全室温配制体系。
高GC扩增:优化的缓冲液配方可高效扩增GC 含量高达 80% 的模板,从而简化引物设计。
宽线性范围:可在8个模板梯度线性范围内展示很高的重复性。
1.高稳定性验证
将 pET28a质粒进行 8 个 10 倍梯度稀释作为模板,使用 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 同时对稀释好的模板进行定量实验,每孔加样量 5 µL,扩增曲线和标准曲线如图 1-a 和 1-b 所示:
图1 高稳定性验证
Fig.1 Validation of high stability
结果:从扩增曲线中可以看到 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 扩增曲线一致,CT 值基本接近,从标准曲线中可以看到不同温度下保存的试剂扩增效率均在 95%-100%之间,R2值均为 0.999。
结论:QST-100 具有极高的稳定性,同时具有卓越的扩增效率,在宽广的模板量区间内具有优秀的线性关系。
2.QST-100 与国产 N 品牌特异性对比
将 pET28a质粒进行 8 个 10 倍梯度稀释作为模板,使用 QST-100 和国产 N 品牌按照各自说明书推荐的体系(模板加样量相同),使用同一程序同时对稀释好的模板进行定量实验,熔解曲线如下图所示:
图2 QST-100 与国产 N 品牌特异性对比
Fig.2 Comparison of specificitybetween QST-100 and Brand N
结果:从熔解曲线中可以看到,QST-100在低浓度和高浓度模板下均为单一峰值,而在低浓度模板下,国产 N 品牌出现了非特异性扩增。
结论:QST-100 熔解曲线峰值单一,具有高特异性,符合 MIQE 要求。
3.QST-100 与进口 T 品牌扩增效率对比
将 pET28a质粒进行 5 个 10 倍梯度稀释作为模板,使用 QST-100 和进口 T 品牌按照各自说明书推荐的体系(模板加样量相同),使用同一程序同时对稀释好的模板进行定量实验,扩增曲线和熔解曲线如图 3-a 和 3-b 所示:
图3 QST-100 与进口 T 品牌扩增效率对比
Fig.3 Comparison of amplification efficiency between QST-100 and Brand T
结果:从扩增曲线中可以看到在同一模板浓度下,QST-100 比进口 T 品牌起峰早,CT 值小。从熔解曲线中可以看到两种试剂均没有出现非特异性扩增, 但QST-100 的 Tm 值低于进口 T 品牌。
结论:在没有非特异性扩增产生的情况下,QST-100 扩增效率高,且有利于高 GC 含量模板扩增。
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