品牌: biomics 公司: 百奥迈科生物技术有限公司

提供商： Biomics Biotech 服务名称： CRISPR /Cas9 基因敲除技术

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CRISPR （ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats）RNA，是最近几年才发现的原核生物中的调控RNA，用以抵御病毒和质粒入侵。在II型CRISPR系统中，CRISPR RNA（crRNA）与转录激活crRNA（Trans-activating crRNA, tracrRNA）退火形成的复合物能特异识别基因组序列，引导Cas9核酸内切酶在目的片段生成DNA双链断裂（double-strand breaks, DSBs）。CRISPR-Cas系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种生物，包括人、小鼠、大鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫、植物及细菌。多个科研小组的研究都显示，与锌指核酸酶（ZFNs）和转录激活样效应核酸酶（Transcription activator-like effector nucleases, TALEN）相比较，CRISPR-Cas系统介导的基因组靶向实验在真核细胞中具有相似甚至更高的效率。

Biomics公司专注于RNA基因调控多年，最新推出基因组编辑工具CRISPR/Cas9专家系统，该系统灵活简单、可以对特定基因组位点进行切割置换，特异性高、细胞毒性低。CRISPR/Cas9系统可广泛应用于基因组工程，如基因抑制，基因敲除，基因敲入，基因修复等。CRISPR-Cas9体系的RNA-DNA识别机制为基因组工程研究提供了一项简便而强大的工具。其最重要的优势是Cas9蛋白可在多个不同的gRNA的引导下同时靶向多个基因组位点，起到多靶点调控的作用。

CRISPR与RNAi的区别目前已经广泛应用的RNAi技术的靶标是mRNA，而CRISPR通过RNA识别DNA序列然后再改变DNA序列，是可以遗传的。由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分，因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多，更有可能筛选出针对某DNA序列的特异CRISPR靶标。

作为一种新的基因编辑技术，CRISPR/Cas9有以下特点和优势：1、操作简单，靶向精确性更高。sgRNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配，Cas9才会对DNA进行剪切。编码sgRNA的序列不超过100bp，因此比构建TALENs和ZENs更简单方便，用于CRISPR的sgRNA识别序列仅需20个核苷酸。2、CRISPR/Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰，其基因修饰可遗传。3、基因修饰率高，基因调控方式多样，例如敲除、插入、抑制、激活等4、可实现对靶基因多个位点同时敲除。5、无物种限制。6、实验周期短，最快仅需2个月，节省大量时间和成本。

 已合作单位：　　北京大学（人）、复旦大学（人）、同济大学（人）、上海交通大学（人）、首都医科大学（鸭）、中烟郑州烟草研究所（烟草）、福建农林大学（草菇、金针菇、大肠杆菌）、温州医学院（鼠）、浙江工业大学（枯草芽孢杆菌）、宁夏大学（解淀粉芽孢杆菌）、深圳大学（人）、暨南大学（鼠/人）、中国水产科学研究院（青鳉）、山东大学（人）、东北大学（动物）、内蒙古自治区医院（人）、弗吉尼亚理工学院（人）、南京农业大学（家蚕/二化螟）、扬州大学（淋病球菌）、中国农业大学（猪）、江苏省农业科学院（支原体）、南方医科大学（人）、武汉大学（水稻/人） 上海市儿童医学中心（人/斑马鱼 激活） 西北农林科技大学（山黧豆）、中国医学科学院医学生物学研究所（人）。吉林农业大学（大肠杆菌/维氏菌） 吉林省农业科学院（双子叶植物） 南开大学（大肠杆菌）、中国农业科学院兰州兽医研究所（金仓鼠）、甘肃农业大学（丝状真菌）、西南大学（人）、 中山大学（单子叶植物）、天津医科大学（人）、湖南师范大学（人）、福建省农科院（卵菌）、广西大学动物繁殖研究所（动物、激活）、中科院国家蛋白质科学中心（人、lncRNA）、华南理工大学、东北师范大学（动物）、新乡医学院（动物）、中国科学院生态环境研究中心（成团泛菌）……

 物种包括：　　1.人；2.家鼠；3.烟草；4.家兔；5.家蚕；6.金仓鼠；7.青鳉鱼；8.芽孢杆菌；9.大肠杆菌；10.食用菌；11.丝状真菌；12.鸭；13.猪；14. 山黧豆；15.卵菌；16.成团泛菌；17.水稻；18.支原体；19.乙肝/HPV等双链DNA病毒；……

两篇science 文章证明CRISPR /Cas9系统在哺乳动物细胞有效RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287722Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287718BiomicsCRISPR/Cas9相关产品：Precut pSG-target Cloning kit & SSA assayDifferent type cas9 expression plasmidCRISPR /Cas9载体T7 sgRNA MICscriptTM KIT/sgRNA synthesis productPrecut SgRNA Cloning kit & pSD-gRNA PlasmidEzOmicsTM RNA QUICK clear KIT-------一步纯化RNA转录产物Biomics CRISPR相关服务：sgRNA序列设计sgRNA表达载体构建sgRNA体外合成全基因组sgRNA文库的构建sgRNA活性检测Surveyor法及测序验证稳定表达Cas9蛋白细胞株筛选利用CRISPR系统进行基因重组donor质粒构建植物CRISPRCRISPR/Cas9技术讨论群：342716231微信号：Biomics-RNAi