品牌: wanleibio
公司: 沈阳万类生物科技有限公司
货号： WLA019b 保存条件： -20℃ 规格： 100T（促销）
产品详情请联系金山科研平台微信：jinshanbio 产品名称： 全蛋白提取试剂盒产品概述： 全蛋白提取试剂盒（Whole Cell Lysis Assay）可用于从哺乳动物组织和细胞中提取全蛋白，用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、IP等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究。保存条件:-20℃保存，本试剂盒自订购之日起一年内有效。操作流程:Ⅰ细胞蛋白提取1.贴壁细胞 ：用预冷的1x PBS洗2-3次， 以洗去培养液。2. 悬浮细胞：将细胞及培养液移至预冷的离心管中，离心10min（1000rpm）后，弃上清。 3. 将预冷的Lysis Buffer按每1ml加入10μl PMSF的比例混匀备用，Lysis Buffer加入量参考下表。
培养板规格细胞数量Lysis Buffer加入量100mm（培养皿）5x10 6个600μl35mm（6孔板）1x10 6个200μl（每孔）
4. 用细胞刮（沉淀振荡）充分破碎细胞，将其倒入离心管中超声；如果没有超声仪，冰上裂解 30min。5.12000rpm，4℃离心 , 10min，上清为全蛋白提取物，可进行蛋白定量。6. 分装保存于-70℃，避免反复冻融。Ⅱ组织蛋白的提取1. 取新鲜组织 , 用预冷的1xPBS洗2-3次。2. 将组织剪成小块 , 放入预冷的研钵中 , 倒入液氮充分研碎。3. 将预冷的Lysis Buffer按每 1ml 加入10μl PMSF的比例混匀备用。4. 每100mg组织应加入0.5-1ml Lysis Buffer，充分研磨。如果粘度过大则再需加入一定量Lysis Buffer 再次研磨，之后进行超声。5.12000rpm，4℃离心 , 10min，上清为全蛋白提取物，可进行蛋白定量。6. 分装保存于-70℃，避免反复冻融。详情请致电咨询：400-602-0407（转2号键）或登录公司官网www.wanleibio.cn 温馨提示：不可用于临床治疗。
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