品牌: genelb 公司: 上海晶莱生物技术有限公司

提供商： 晶莱生物 服务名称： 荧光定量PCR 规格： 荧光定量PCR

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【晶莱生物】提供快捷高效的实时荧光定量PCR(Real Time PCR,RT PCR)服务，所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。是一个常用的mRNA水平的基因表达定量技术。服务内容细胞/组织的基因差异表达检测，经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等)，特定基因在不同时段的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证。组织/细胞样品中基因拷贝数的确定，DNA或RNA的相对和绝对定量分析。包括病原微生物或病毒含量的检测，转基因动植物转基因拷贝数的检测，RNAi基因失活率的检测等。基因分型，基因突变及多态性方面的研究。技术原理Real-time PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。实时荧光定量PCR技术具有特异性强，有效解决了PCR污染问题、自动化程度高等特点，做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定Ct值，从而根据Ct值确定起始DNA拷贝数，做到了真正意义上的DNA定量。技术流程一、RNA的提取二、DNase I 消化样品RNA 中的DNA三、RNA琼脂糖凝胶电泳四、RNA反转录为cDNAReal-Time PCR引物设计的要求① Tm=55~65 ℃② GC=30~80%③ PCR扩增产物长度：引物的产物大小不要太大，一般在80~300 bp之间都可。④ 引物的退火温度要高，一般要在60 ℃以上。五、cDNA与引物质量检测选择特异性好，扩增效率高的引物作为实时荧光使用引物。六、利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况：常用的看家基因有β-actin，GAPDH，18S rRNA七、定量PCR检测八、扩增曲线和溶解曲线溶解曲线全部为单峰表明为特异性扩增，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。收费标准/服务周期/提供结果：欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。更多实验技术服务请浏览网站其他内容，或来电咨询！做实验，找晶莱！您的科研生涯，我们一路相伴！【平台项目开展范围】慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验，芯片类实验，并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI、核心期刊等服务。全国统一咨询服务热线:4008-766-085【上海公司】上海市嘉定区槎溪路788弄1号17层【北京公司】北京市丰台区政馨园一区2号楼1206室【长沙公司】长沙市高新区麓谷大道627号新长海中心B2-403室【技术咨询】15801748762【公司邮箱】lab-china@genelb.cn【全国业务咨询】北京：18810244671 上海：15800916241 长沙：15616228964 武汉：15201856307 西安：13651049420 广州：18810244571 成都：18500539084 沈阳：15800620041 其他地区：13818286017【晶莱生物】已开展了数千个实验外包项目。我们专注于医学课题研究，已从课题申请、方案设计、试剂采购、模型构造、标本检测、数据分析、以及对SCI撰写与发表的支持，各个环节积累了数千个成功案例经验，为数千个来自临床的科研工作者解决了大量的科研问题。更多相关实验服务信息请咨询晶莱生物