品牌: biomedworld 公司: 沃登医学

提供商： 沃登医学 服务名称： 荧光素酶报告基因检测

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荧光素酶报告基因检测一、荧光素酶报告基因检测服务介绍荧光素酶报告基因检测是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。二、荧光素酶报告基因检测服务内容1）用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。5） 培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。6） 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。7）提取蛋白并用于荧光素酶检测。8） 加入底物，测定荧光素酶的活性。9） 计算相对荧光强度，并与空载对照比较。三、荧光素酶报告基因检测服务说明1.客户提供：含有荧光素酶报告基因的重组质粒（如需公司提供请说明）。2.服务周期：3-4周3.若另有疑问请致电本公司咨询，我们将竭诚为您服务。四、荧光素酶报告基因检测质量承诺1.权威的鉴定报告；2.原始的实验数据；3.详细的实验步骤。