锌粉还原是以锌粉为还原列将芳香族硝基化合物转换成芳香胺类化合物或联芳胺类化合物的过程。 在酸性介质中,锌粉可将硝基苯转换成苯胺;在强碱性介质中,锌粉可将邻氯硝基苯转换成氛化偶氮苯类化合物
SimpSil锌还原柱50mm*4.6mm根据《GB 5009.158-2016 食品安全国家标准食品中维生素K1的测定》进行填装,将锌粉密集装入不锈钢材质的柱套(柱长50mm,内径4.6mm)中。装柱时,应连续少量多次将锌粉装入柱中,边装边轻轻拍打,以使装入的锌粉紧密。
实验中,由于维生素k的不饱和酮结构共轭体系较小,不能产生荧光,SimpSil锌还原柱50mm*4.6mm对维生素K1进行还原,使维生素k同系物的母核萘琨环产生荧光,以提高其在高效液相色谱荧光检测器上的响应值,从而达到检测目的。
《GB 5009.158-2016 食品安全国家标准食品中维生素K1的测定》节选:
5.3色谱参考条件
a)色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或具同等性能的色谱柱;
b)锌还原柱:柱长50mm,内径4.6mm;
c)流动相:按3.2.4配制;
d)流速:1mL/min;
e)检测波长:激发波长为243nm,发射波长为430nm;
f)进样量:10μL;
g)标准溶液的色谱图见附录B。
5.4标准曲线的制作
采用外标标准曲线法进行定量。将维生素K1标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以峰面积为纵坐标,以标准系列工作液浓度为横坐标绘制标准曲线,计算线性回归方程。
5.5试样溶液的测定
在相同色谱条件下,将制备的空白溶液和试样溶液分别进样,进行高效液相色谱分析。以保留时间定性,峰面积外标法定量,根据线性回归方程计算出试样溶液中维生素K1的浓度。
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