Quin 2试剂货号：Q001 8-Amino-2-[(2-amino-5-methylphenoxy)methyl]-6-methoxyquinoline-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetrapotassium salt CAS号：73630-23-6 商品信息 储存条件：室温 运输条件：室温 分子式：

C₂₆H₂₃K₄N₃O₁₀

分子量：

693.87

特点：

● 激发波长339nm，发射波长492nm

● 能够轻易的穿过细胞膜

选择规格： 50 mg

产品性状

规格

性状： 本产品为淡黄色粉末，可溶于水

纯度（HPLC）: 95%以上

摩尔吸光系数 ： 34,000 以上(240 nm附近)

水溶性： 符合要求

处理条件

保存方法 ： 避光，常温

产品概述

Quin 2能够和钙（logKCaY=7.1）形成稳定的荧光螯合物，但和镁却不行（logMgY=2.7）。这种螯合物在525 nm的发射波长处有着很高的量子产量（0.14），Quin 2的激发波长为339 nm，发射波长为492 nm。Quin 2-AM是Quin 2的乙酰甲酯衍生物，能够轻易地穿过细胞膜。进入细胞后，酯结构立刻被水解，形成Quin 2。

原理

Quin 2能够和钙（logKCaY=7.1）形成稳定的荧光螯合物，但和镁却不行（logMgY=2.7）。这种螯合物在525 nm的发射波长处有着很高的量子产量（0.14），Quin 2的激发波长为339 nm，发射波长为492 nm。Quin 2-AM是Quin 2的乙酰甲酯衍生物，能够轻易地穿过细胞膜。进入细胞后，酯结构立刻被水解，形成Quin 2。

激发发射波长

E x ：339 nm

Em： 492 nm

溶解比例

溶解比例：84 mg/100 mL（水）

注意事项

1、试剂容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量，开封前，请轻弹管壁几次，以保证粉末落入管底。

2、第一次使用时, 建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用，以保证实验效果。

3、溶解液 DMSO 需要保证新鲜无水，否则将会导致 AM 体水解，使荧光染料无法进入细胞，影响实验效果。

4、母液遇水极易分解，如果不能一次用完建议分装保存，例如分装成 5 μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在≤-20℃密封避光保存。

5、建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件

文献

1) R. Y. Tsien, “New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons:　Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures”, Biochemistry, 1980, 19 (11), 2396.

2) R. Y. Tsien, T. Pozzan and T. J. Rink, “Calcium Homeostasis in Intact Lymphocytes: Cytoplasmic Free Calcium Monitored with a New, Intracellularly Trapped Fluorescent Indicator”, J. Cell Biol., 1982, 94, 325.

3) M. B. Feinstein, J. J. Egan, R. I. Sha’afi and J. White, “The Cytoplasmic Concentration of Free Calcium Inplatelets Is Controlled by Stimulators of Cyclic AMP Production (PGD2, PGE1, FORSKOLIN)”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1983, 113, 598.

4) N. Miyoshi, K. Hara, S. Kimura, K. Nakanishi and M. Fukuda, “A New Method of Determining Intracellular Free Ca2+ Concentration Using Quin　2-fluorescence”, Photochem. Photobiol., 1991, 53 (3), 415.

Q&A

Q1:细胞内检测钙离子的试剂种类都有什么，选择什么样的比较好呢？

A1: 根据检测仪器和检测波长有很多的选择，产品后面标有AM的试剂是可以通过细胞膜的 有很多种相似的试剂，其特点如下： 【Fura 2】 •双波长激发 激发(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、发射：λem=500 nm •解离常数：224 nmol/L •因为是荧光强度的比值、可以有效的减小误差 =>細胞内Ca浓度计算。 •该试剂被使用的最多 •必须要更换过滤片、会耽误一些时间。 【Fluo 3】 •单波长激发 激发：λex=508 nm、发射：λem=527 nm •解离常数：400 nmol/L •因为激发光在长波段，所以对细胞的损伤比较小 （不会受到NADH、NADPH的影响） •可以使用Ar激光激发装置。 •不适合切片中钙离子的检测 •【Fluo 4】 •单波长激发 •激发：λex=495 nm、发射：λem=518 nm •解离常数：360 nmol/L •与Fluo3相比对荧光强度更高。 •因为激发光在长波段，所以对细胞的损伤比较小 •（不会受到NADH、NADPH的影响） •可以使用Ar激光激发装置。 •与Fluo3相比对細胞的毒性低 •【Indo 1】 •单波长激发 •激发：λex= 330 nm、发射(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm) •解离常数：250 nmol/L •由于不需要更换滤光片，可以很快地检测细胞内钙离子浓度变化以及像心肌细胞运动中钙离子的变化 •（需要两台检测仪器） •【Rhod 2】 •单波长激发 •激发：λex=553 nm、发射：λem=576 nm •解离常数：1.0 μmol/L •因为激发光在长波段，所以对细胞的损伤比较小 •（不会受到NADH、NADPH的影响） •可以使用Ar激光激发装置。 •【Quin 2】 •单波长激发 •激发：λex=339 nm、发射：λem=492 nm •解离常数：110 nmol/L •最早开发的产品