Biofilm Viability Assay试剂盒货号：B603 生物被膜药物杀伤效果检测试剂盒 可以检测生物被膜内微生物的存活率、代谢活性 商品信息 储存条件：0-5°C 运输条件：常温 选择规格： 96tests

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规格性状

・WST Solution 1 ml×1

・Electron Mediator Reagent 0.12 ml×1

・96-peg-Lid ×1

・96-well Plate ×10

在针状孔板盖(96-peg-Lid)的针状突起表面形成生物被膜

产品概述

生物被膜(Biofilm)是一种主要由细菌体外的多糖组成的膜状复合体，可以在几乎所有的环境下广泛存在。医疗器具的细菌污染、龋齿、牙周炎等感染症等都与生物被膜的形成有关。由于生物被膜一旦形成，会对抗生素等药物产生抗性，进而引起严重的污染问题。因此，具有抑制生物被膜活性的药物和食品成分成为近年来的研究热点。

Biofilm Viability Assay Kit可以检测微生物的代谢活性。检测过程中，生物被膜在孔板盖的针形突起表面生长，所以在清洗和染色操作中生物被膜不易脱落。同时，通过使用多孔板，可以一次性进行多样品检测。

BiofilmViabilityAssayKit的特长和操作

检测原理

Biofilm Viability Assay Kit是通过检测生物被膜内的活细菌的代谢活性来评价药物对生物被膜内的微生物杀伤效果的试剂盒。NADH(NADPH)是一种参与微生物能量代谢的辅酶，它可以通过电子载体，将WST还原成有颜色的甲臜染料(Formazan)。通过检测这个还原能力，可以表征微生物的代谢活性。

操作

本试剂盒可以对生物被膜形成量和药物对生物被膜抑制能力进行检测。检测过程中，生物被膜在孔板盖的针形突起表面生长，所以在清洗和染色操作中生物被膜不易脱落。同时，通过使用多孔板，可以一次性进行多样品检测。

试剂盒选择

针对两种不同用途的试剂盒选择

使用针状孔板盖(96 Peg-Lid)的试剂盒一共有两款，分别通过结晶紫染色法和WST显色法进行检测，供您根据具体的需求自由选择。

两种试剂盒的选择方法

*不同的菌种，生物被膜的形成条件(培养基、培养时间等)也不相同。建议先使用Biolfilm Formation Assay Kit(关联产品)进行摸索。具体的摸索方法请参考FAQ “如何摸索生物被膜最佳实验条件”

*本试剂盒是由同仁化学研究所和日本福冈县工业技术中心—生物食品研究所共同开发。

检测实例

常见的生物被膜检测指标有两种：MBIC(Minimum Biofilm Inhibitory Concentrations,抑制生物被膜形成的最低浓度)和MBEC(Minimum Biofilm Eradication Concentrations,细菌生物被膜的最小清除浓度)。下面用各试剂盒分别检测对S.aureus(金黄葡萄球菌)的MBIC和MBEC。

Biofilm关联产品

用检测片评价抗菌材料对生物被膜的抑制能力

Biofilm TestPiece Assay Kit(货号：B606)

需要对抗菌材料的生物被膜抑制能力进行评价的时候，使用同仁化学研究所独自研发出的TestPiece Holder(检测片固定盖)可以大幅缩短检测时间，并且得到重现性更高的检测数据。

与传统法的比较

菌种：Staphylococcus aureusNBRC13276

复孔数： n=8

常见问题Q&A

Q：加入显色试剂以后，培养多长时间比较合适？

A：不同微生物种类，代谢活性不同，显色所需要的时间也不同。第一次检测时，建议每培养一定时间就检测一下吸光度，最长一般不超过24 h，以确定最佳培养时间。S. aureus和S. mutans两个菌种可以参考操作说明书的图2和图3。

Q：是否可以使用450 nm以外的滤光片进行检测？

A：440~480 nm范围内的滤光片均可使用。

Q：做细菌被膜抑制药物的药效评价时，生物被膜的形成量至少要达到什么程度？

A：使用Biofilm Formation Assay Kit (货号B601)检测时，操作步骤的最后一步，检测结晶紫(CV)溶液的吸光度时，O.D.在0.5(590 nm)以上为宜。

Q：目前有过检测实例的菌种有哪些？

目前Biofilm Viability Assay Kit(本产品)以及同系列产品Biofilm Formation Assay Kit (货号B601)有过实际检测案例的菌种有： ・Staphylococcus aureus（金黄葡萄球菌） ・Pseudomonas aeruginosa（绿脓杆菌） ・Escherichia coli（大肠杆菌） ・Streptococcus mutans（虫牙的病原菌之一） ・Porphyromonas gingivalis（牙周病的发病原因之一） 以上菌种的详细培养条件等请参考产品说明书。