QuantiFast SYBR Green PCR Kit
快速分析,节约至60%的时间含单细胞灵敏度极热启动PCR酶HotStarTaq通用的操作流程用于标准和快速定量PCR仪可特异性检测低拷贝的模板,准确检测各种起始量的模板优化的即用型预混液用于快速循环QuantiFast SYBR Green PCR Kit原理
缩减多至60%的PCR运行时间(见图“明显缩减时间”),让您可更快获取结果。您也可以大幅度提高样本通量,或通过与其他用户共用PCR仪。试剂盒提供*的PCR缓冲夜,包含正在申请的添加剂Q-Bond,可缩减变性、退化和延伸时间(见图 “引物快速退火”)。缓冲夜也包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase,激活该聚合酶在95°C 的条件下只需5分钟。可快速获取PCR结果的同时丝毫不影响PCR的表现(见图“在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果,PCR表现有保障”)。
应用可获得高特异、高灵敏的结果,胜过快速循环模式下的其他 real-time PCR 试剂盒(见图 “iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR”)。快速PCR缓冲夜中KCl和NH4Cl 的平衡组合有利于特异引物的退火,支持高特异性的PCR。另外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase 确保起始严谨,避免形成非特异性的产物。
确保对模板得多个稀释倍数可精确定量分析靶分子。即使是差异较小的低拷贝也可有明显的差异(见图 “在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率”)。
过程
是即用型预混液,无需优化反应和循环条件。操作手册提供可用于所有real-time PCR仪的操作程序。
2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液组分
组分 | 特性和优点 |
HotStarTaq Plus DNA Polymerase | 95ºC 下激活只需5分钟,确保快速严谨的启动。 |
QuantiFast SYBR Green PCR Buffer | *的缓冲夜成分,包含Q-Bond,缩减变性、退火和延伸时间,离子平衡有利于特异性引物延伸。 |
dNTP Mix | dATP、dCTP、 dGTP和dTTP混合物 |
SYBR Green I dye | 结合双链DNA,产生强烈的荧光信号。无需设计序列特异性探针,可定量分析任何靶分子。 |
ROX dye | Applied Biosystems与任意Stratagene仪器上荧光信号标准化 。在任何real-time R仪上不干扰PCR反应。 |
2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液可储存在2-8ºC,无需解冻反应组分,可更快构建反应体系。
应用
适用于任何real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid,、Corbett、Eppendorf、 Roche和Stratagene的仪器。
为了获得*的real-time两步法RT-PCR结果,我们推荐使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,同时去除基因组。除了QuantiTect Reverse Transcription Kit 还可应用FastLane Cell cDNA Kit,该试剂盒可直接从培养细菌中制备cDNA,没有纯化RNA。如果只有少量的RNA模板,我们建议应用QuantiTect Whole Transcriptome Kit制备cDNA存档,该试剂盒可均一扩增靶分子,确保可靠的基因表达分析。
对于两步法real-time RT-PCR我们也推荐QuantiTect Primer Assays ,这是全基因组的,多样的,经验证的引物系列。
对于普通PCR,我们推荐QIAGEN Fast Cycling PCR Kit,该试剂盒基于与QuantiFast Kits同样的技术,可在任何PCR仪上实现快速、特异性PCR 。
Images
大幅度缩减PCR运行时间 引物快速退火 在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果,PCR表现有保障 iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR 在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率 Specific primer annealing.
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