天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 | 授权代理

2023-08-05

天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品简介:
产品品牌:天恩泽
产品名称:荧光及可视化LAMP试剂盒
产品规格:50次
产品货号:200601-50
运输:低温
保存:-20℃

天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50

我们上海金山科研平台公司作为天恩泽公司的代理商,先简单介绍一下天恩泽公司:

北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上,公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验;公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验;同样,公司的运营团队也有丰富的执行经验。

北京天恩泽公司充分了解客户的需求,并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长,成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。

DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。

天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品简介:

产品品牌:天恩泽

产品名称:荧光及可视化LAMP试剂盒

产品规格:50次

产品货号:200601-50

产品价格:1390元

运输:低温

保存:-20℃

有效期:1年

货期:1-3天

天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品说明:

本产品是根据本公司的双染料LAMP技术开发的荧光和可见光双模式 LAMP扩增及检测试剂盒,它既可以用于荧光LAMP 扩增及检测,也可以用于 可视化LAMP 扩增及检测,适用于各种针对核酸的快速定性检测。本产品具有 下列特点:

1. 一般60分钟内出结果(取决于靶分子浓度),比PCR快约1小时。

2. 对20 μL的反应体系,可以样品加样量达到14 μL。

3. 含可见光和荧光染料,既可以用金属浴和水浴扩增用可见光肉眼判断结果, 也可用荧光PCR仪进行实时荧光检测。

4. 内含的dUTP-UNG可防交叉污染。

5. 特异性比PCR高,因为LAMP 扩增使用4-6条引物而不是两条。

6. 灵敏性可达10拷贝/反应以下(随引物而不同),故假阴性率更低。

7. 本产品跟北京天恩泽的多种免提取试剂盒(如免提病毒保存液)兼容。

8. 只可用于科研,只可进行定性检测,不能用于定量检测。

9. 本产品只适用于LAMP 检测,不适用于进行RT-LAMP检测。

10. 本产品足够50次20 μL体系的荧光及可视化LAMP 扩增。

天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品规格:

成分

编号

5孔塑料盒包装

4×荧光及可视化LAMP MagicMix

200601a

250 μL(绿盖)

4×阳性对照模板-引物混合物

130923a

50 μL(黄盖)

使用手册

200601sc

1份

运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。

使用方法:

自备试剂 :LAMP模板及LAMP引物、PCR级石蜡油(仅对使用金属浴或水浴者)。

准备工作:如果使用水浴锅或金属浴,需要在实验启动前打开并调到65℃。如 果用金属浴,还必须在孔中加水以填充金属孔和反应管间的空隙。本公司发现 很多水浴锅或金属浴温度不准,故建议先用阳性对照和阴性对照测试所用仪器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五个温度下扩增效果,选择阳性和阴 性颜色差异ji大的温度进行扩增。

一、样品DNA的制备 1. 用自选方法纯化样品DNA,本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼 容,可以选购本公司的各种免提取试剂盒。 2. 如果有 N 个样品,则至少需要做 N+2 个样品制备,包括一个制备阳性对 照(制备时加入自备的跟要检测的靶分子相同的阳性对照模板,一起经历提取过程)和一个制备阴性对照(用水替代样品)。ran后N+2个样品一起 进行DNA提取操作,得到N+2个DNA样品。

二、配制并测试自备的20×LAMP引物混合液 3. 用超纯水将自备的6种(或4种)LAMP 引物干粉稀释到母液浓度(100 μM),然后按下表配制100μL的20×LAMP 引物混合液,此混合液足够 100次20 μL体系的LAMP扩增。如果需要配制的20×LAMP 引物混合 液体积异于 100 μL,则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在 -20℃放置2年。

引物名称

母液浓度

加母液量

在20×LAMP引 物混合液中的浓度

FIP引物

100 μM

32 μL

32 μM

BIP引物

100 μM

32 μL

32 μM

F3引物

100 μM

4 μL

4 μM

B3引物

100 μM

4 μL

4 μM

Loop F

100 μM

8 μL

8 μM

Loop B

100 μM

8 μL

8 μM

超纯水

12 μL

注意:总体积为100 μL。如果自备的LAMP引物不含Loop引物,则按上 表配制时Loop用超纯水替代,使得总体积为100 μL。 4. 测试引物的非特异扩增:在加模板和不加模板(至少1000拷贝/反应)的 LAMP 系统中测试引物效果,引物选择标准可以自己掌握,可以选择无模 板反应的Ct值比有模板反应的Ct值大60以上(每个循环1 分钟)的引 物对。根据结果设定判断阴性和阳性结果的阈值(本产品只用于定性)。 如果没有 qPCR仪器,只能用肉眼检测,则无需设定阈值,届时靠跟阳性 对照和阴性对照管的颜色来判断。

LAMP扩增(20 μL体系)

反应设置:如果有 N+2 个 DNA 纯化样品,则可以设置 N+5 个LAMP 扩 增,增加扩增阳性对照、无模板对照和无引物对照各1个。在 N+5个0.2mL 的PCR管中加入下列成分:

成分

N+2个 样品管

无模板 对照管

无引物 对照管

扩增阳性 对照管

4×荧光及可视化 LAMP MagicMix

各5 μL

5 μL

5 μL

5 μL

自备20×引物混合液

各1 μL

1 μL

自备N+2 个 样品DNA

较多14 μL

同样品管

4×阳性对照 模板-引物混合物

5 μL

超纯水

补到20μL

补到20μL

14 μL

10 μL

6. 混匀后进行扩增,可以根据实验室条件选择下列两种方式进行扩增和检测。

7. 如使用金属浴、水浴或普通无热盖 PCR 仪,则每管加 30μL 石蜡油,再 65℃保温120分钟。如不加石蜡油,保温期间水分蒸发,会有非特异扩增。

8. 如果使用荧光定量 PCR 仪:聚合温度设为 65℃,1 次循环 1 分钟,120 个循环,每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。 三、结果分析及解读 9. 阈值设定:在*分钟荧光值会升高再稳定,故只能取第10到15分钟 的荧光值作阈值。此现象估计是常温下可见光染料和荧光染料结合并对后 者有淬灭作用,加热到65℃后两种染料分开,淬灭逐渐解除,荧光逐渐升 高,10分钟后稳定。没加可见光染料的反应无此现象。 10. 所有阳性对照有阳性结果(Ct 在60以内或反应液呈蓝色),所有阴性对 照有阴性结果(Ct 大于60 或反应液呈淡蓝色),否则提取实验或扩增实 验无效。需要寻找原因或跟厂家联系,暂时不需要分析样品的结果。 11. 如果阳性和阴性对照结果正常,则实验有效,可以分析样品的情况。如果 肉眼观察,样品管的颜色接近扩增阳性对照管则说明有扩增有靶分子,如 果接近无模板和无引物的阴性对照,则说明无扩增无靶分子。反应结果示 例如下(9为阴性,10为阳性)

12. 如果是用荧光PCR仪,样品Ct将小于阈值则为阳性,大于阈值则为阴性。

13. 当实时荧光检测和可视化检测同时使用时,如果不一致,以实时荧光LAMP 的数据为准。一般可视化结果滞后实时荧光检测结果20-30分钟,也就是 说,在 qPCR 仪上第 30 分钟时呈现阳性的样品,其颜色变化在第 50-60 分钟时才能观察到。

关联产品:免核酸纯化病毒保存液,PCR级石蜡油

以下是天恩泽品牌部分热销产品,如需其他品牌产品请咨询本店客服:

品牌

产品货号

货品名称

规格

天恩泽

200101-50

第二代病毒采运试剂盒(低敏型)原拭子病毒采运试剂盒,核酸诊断用

50次/盒

天恩泽

200201-50

第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒

50次/盒

天恩泽

200601-50

荧光及可视化LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

200603-50

荧光及可视化RT-LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

200108-2.5L

xinguan病毒灭活液A型

2.5L/瓶

天恩泽

91103-250

非冻型拭子病毒保存液

250ml/瓶

天恩泽

15-81920

SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

16-81920

SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

15-23000

African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

16-23000

African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

15-29420

Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

71201-50

柱式动物RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

71001-50

柱式病毒RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

60705-50

一管式植物DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

3070-100

动物RNA提取试剂盒(TRIzol)

100mL/瓶

天恩泽

81027-50

TRIzol伴侣

50次/套

天恩泽

70701-50

柱式病毒DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

3674-50

一管式病毒DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

90404-50

柱式植物RNA提取试剂盒2.0

50次/套

天恩泽

60802-50

柱式细菌DNA提取试剂盒

50次/盒

天恩泽

71203-50

柱式植物RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

60602-50

柱式植物DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

90315-250

非冻型尿液DNA保存液

250mL/瓶

天恩泽

3660-250

非冻型组织DNA保存液

250mL/瓶

天恩泽

3060-250

非冻型组织RNA保存液

250m/瓶

天恩泽

90805-10

即用型PCR试剂盒3.0

1ml×10/盒

天恩泽

90708-1.5

即用型高保真PCR试剂盒

1.5mL/瓶

天恩泽

90408-1

2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)

1ml/管

天恩泽

190303-1

2X 探针法qPCR Mix (TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒)

1ml/管

天恩泽

101005-100

即用型易错PCR试剂盒

100次/套

天恩泽

160903-100

可调式易错PCR试剂盒

100次/套

天恩泽

3090-250

天净沙RNase清除剂A型(原固相RNase清除剂)

250mL/瓶

天恩泽

3091-1.5

天净沙RNase清除剂B型(原液相RNase清除剂)

1.5mL/套

天恩泽

140648-250

PCR污染清除剂

250 mL/瓶

天恩泽

70902-1.5

PCR级甜菜碱溶液,5M

1.5mL/管

天恩泽

100805B-250

Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用)

250ml/瓶

天恩泽

130502-50

无内毒素水

50mL/瓶

天恩泽

160251-250

4%中性甲醛固定液

250mL/瓶

天恩泽

100302-100

包涵体蛋白溶解及复性套装

100次/次

天恩泽

200604

核酸释放剂(DNA-RNA通用型)

300次/盒

天恩泽

61202-10

天净沙核酸释放剂

10mL/瓶

天恩泽

70303-1.5

绿如蓝核酸染料(UV)

1.5mL/管

天恩泽

70503

DNA电泳分子量标准系列

50次/管

天恩泽

小师弟

高压快速电泳预制胶

10块/盒

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